AN IMPROVED METHOD FOR QUANTIFICATION OF HETERODERA GLYCINES IN PLANT TISSUES [MÉTODO MEJORADO PARA LA CUANTIFICACIÓN DE HETERODERA GLYCINES EN TEJIDOS VEGETALES]

Wei-bin Ruan, Li-li Zhan, Wei Xiao, Senyu Chen

Abstract


Ruan, W., L. Zhan, W. Xiao, S. Chen. 2012. An improved method for quantification of Heterodera glycines in plant tissues. Nematropica 42:237-244. An improved maceration method with pretreatment of freezing roots was developed for extraction and quantification of the soybean cyst nematodes (Heterodera glycines) in soybean (Glycine max) roots. The roots were frozen at −20°C and thawed for two to three cycles to soften and break the tissues before being macerated with a blender, and then centrifuged in sucrose solution. The nematodes in different life stages extracted by this method without staining can be counted under an inverted microscope or a stereomicroscope. The nematode extraction efficiency with this method was approximately 95%. The number of nematodes determined by this new method was highly correlated with that determined by counting nematodes directly from stained roots under stereomicroscope, and the accuracy was also greater. This new method is reliable, efficient, and environmental friendly for quantifying nematodes from plant roots.

Ruan, W., L. Zhan, W. Xiao, S. Chen. 2012. Método mejorado para la cuantificación de Heterodera glycines en tejidos vegetales. Nematropica 42:237-244. Se desarrolló un método mejorado de maceración de las raíces mediante la congelación previa de las mismas para la extracción y cuantificación de los quistes del nematodo de la soja (Heterodera glycines) en raíces de soja (Glycine max). Las raíces se congelaron a −20°C y descongelaron repitiéndose el ciclo dos o tres veces para ablandar y romper los tejidos vegetales antes de macerarlas en una batidora y su posterior centrifugación en una solución de sacarosa. Los diferentes estadios del ciclo de vida del nematodo extraídos mediante este método se pueden contar en un microscopio invertido o bajo una lupa sin necesidad de tinción. La eficiencia de la extracción de los nematodos mediante este método fue de aproximadamente 95%. Se encontró una alta correlación entre el número de nematodos determinados mediante este nuevo método y el conteo directo de las raíces teñidas bajo la lupa y la precisión también fue mayor. Este nuevo método proporciona resultados reproducibles, es eficiente y compatible con el medio ambiente para la cuantificación de nematodos en las raíces de las plantas.

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